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              糖酵解系列_丙酮酸激酶(PK)測試盒_微量法

              • 更新時間:  2022-07-26
              • 產品型號:  100管/96樣
              • 簡單描述
              • 糖酵解系列_丙酮酸激酶(PK)測試盒_微量法由上海紀寧生物公司提供,包括PK檢測試劑盒說明書,免費代測,規格,包裝,品牌等關于有關本司測試盒所有產品的詳細介紹
              詳細介紹

              糖酵解系列_丙酮酸激酶(PK)測試盒_微量法

              測定方法:微量法

              產品規格:100管/96樣

              注   意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

              測定意義:

              PK(EC 2.7.1.40)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化糖酵解過程中的后一步反應,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,也是產生ATP的關鍵酶之一,因此測定PK活性具有重要意義。

              糖酵解系列_丙酮酸激酶(PK)測試盒_微量法

              測定原理:

              PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脫氫酶進一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PK活性。

              需自備的儀器和用品:

              紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

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              試劑的組成和配制:

              提取液:100mL×1瓶,4℃保存;

              試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;;

              試劑二:粉劑×2瓶,-20℃保存;

              試劑三:液體10μL×2支,4℃保存;

              樣本的前處理:

              1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

              2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

              3、血清(漿)樣品:直接檢測。



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